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血細胞化學染色的常見染色方法
點擊次數:116 更新時間:2025-04-23

  1.過氧化物酶染色(POX)

  (1)原理:過氧化物酶能分解過氧化氫而釋放出新生態(tài)氧,使無色聯苯胺氧化成藍紫色,后者與硝x普鈉結合形成藍黑色的顆粒,沉淀于細胞質中。

 ?。?)操作方法:將固定液滴加在新鮮骨髓或血涂片上,固定30秒,流水沖洗,晾干。將應用也滴加在血膜上,作用10~15分鐘,流水沖洗。用蘇木素或吉姆薩液復染10分鐘,流水沖洗,晾干鏡檢。

  (3)正常參考范圍:陰性。

 ?。?)臨床意義:急性粒細胞白血病時,白血病細胞多呈強陽性;急性單核細胞白血病呈弱陽性或陰性;急性淋巴細胞白血病呈陰性反應。主要用于急性粒細胞白血病和急性淋巴細胞白血病的鑒別。

  2.α-醋酸萘酚酯酶染色(α-NAE)

 ?。?)原理:α-醋酸萘酚酯酶能將基質液中的α-醋酸萘酚水解,產生α-萘酚,再與重氮染料偶聯,可形成不溶性的有色沉淀,沉淀于細胞質中。

  (2)操作方法:將甲醛生理鹽水滴加在2張新鮮骨髓或血涂片上固定5分鐘,或用甲醛蒸汽固定5~10分鐘后,流水沖洗,晾干。將2張涂片分別放入兩份基質液中,置于37℃水浴60分鐘,流水沖洗。甲基綠溶液復染5~10分鐘,流水沖洗,晾干鏡檢。

  (3)正常參考范圍:陰性。

  (4)臨床意義:急性單核細胞白血病細胞呈強陽性,但由于α-醋酸萘酚酯酶的活性會被氟化鈉抑制,故染色時常同時做氟化鈉抑制試驗。急性粒細胞白血病時,呈陰性或弱陽性,不被氟化鈉抑制。主要用于急性單核細胞白血病與急性粒細胞白血病的鑒別。

  3.中性粒細胞堿性磷酸酶染色(NAP)

 ?。?)原理:中性粒細胞堿性磷酸酶在pH 9.6左右環(huán)境中,能水解磷酸萘酚鈉底物釋放出萘酚,后者與重氮染料偶聯,可形成不溶性的有色沉淀(紅色顆粒),定位于細胞酶活性所在處。

  (2)操作方法:將固定液覆蓋于新鮮血片30~60秒,流水沖洗,晾干。將涂片置基質液,或漿基質液直接滴加在血膜上,37℃水浴45分鐘,流水沖洗,晾干。甲基綠復染5~10分鐘,流出沖洗,晾干鏡檢。

 ?。?)正常參考范圍:中性粒細胞堿性磷酸酶陽性率為10%~40%;中性粒細胞堿性磷酸酶指數為35~70分。

 ?。?)臨床意義:中性粒細胞堿性磷酸酶活性增高可見于細菌性感染、類白血病反應、再生障礙性貧血、急慢性淋巴細胞白血病、多發(fā)性骨髓瘤等;活性下降見于慢性粒細胞白血病、陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥、骨髓增生異常綜合征等。可用于慢性粒細胞白血病和類白血病反應的鑒別、細菌性感染與病毒性感染的鑒別、再生障礙性貧血與陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥的鑒別等。

  4.鐵染色

 ?。?)原理:人體內有一定量的以鐵蛋白和含鐵血黃素形式貯存的鐵元素,這些鐵在酸化的低鐵qing化鉀溶液中反應,生成藍色的亞鐵氰化鐵沉淀(普魯士藍),定位于含鐵的部位。

  (2)操作方法:將染色液滴加在骨髓小粒豐富的骨髓涂片上,室溫20~30分鐘,流水沖洗,晾干,觀察中幼紅細胞、晚幼紅細胞胞質中的鐵。

  (3)正常參考范圍:細胞外鐵,“+"~“++";細胞內鐵,鐵粒幼細胞陽性率19%~44%,以Ⅰ型為主,少數為Ⅱ型。

 ?。?)臨床意義:是目前診斷缺鐵性貧血及指導鐵劑治療的檢驗方法之一。對骨髓增生異常綜合征分型的診斷也有意義。

  5.糖原染色(PAS)

  (1)原理:過碘酸將血細胞內的糖原氧化,生成醛基。醛基與雪夫液中的無色品紅結合,形成紫色化合物,定位于細胞質中。

  (2)操作方法:干燥涂片,滴加甲醛固定液固定10分鐘,流水沖洗,晾干。滴加過碘酸溶液作用20分鐘,流水沖洗,晾干。滴加雪夫液作用60分鐘,流水沖洗,晾干。滴加甲基綠溶液復染10分鐘,流水沖洗,晾干鏡檢。

  (4)臨床意義:根據染色陽性程度和陽性物形態(tài)鑒別主要用于急性淋巴細胞白血病和急性非淋巴細胞白血病鑒別,還有助于紅白血病與巨幼細胞貧血和溶血性貧血的鑒別診斷。


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